國(guó)家非洲豬瘟參考實(shí)驗(yàn)室 

　　3月22日，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局發(fā)布關(guān)于養(yǎng)豬場(chǎng)非洲豬瘟變異株監(jiān)測(cè)技術(shù)指南。為指導(dǎo)養(yǎng)豬場(chǎng)做好非洲豬瘟監(jiān)測(cè)工作，及時(shí)發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病毒特別是變異株感染情況，提升非洲豬瘟防控能力，特制定本技術(shù)指南。

　　一、非洲豬瘟變異株的定義

　　非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等，與2018年傳入的非洲豬瘟毒株相比，該類毒株的基因組序列、致病力等發(fā)生明顯變化。生豬感染該類毒株后，潛伏期延長(zhǎng)，臨床表現(xiàn)輕微，后期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、皮膚出血型壞死灶，感染母豬產(chǎn)仔性能下降、死淘率增高，出現(xiàn)流產(chǎn)死胎/木乃伊胎等。與傳統(tǒng)的流行毒株相比，生豬感染該類毒株后排毒滴度低、間隙性排毒，難以早期發(fā)現(xiàn)。

　　二、監(jiān)測(cè)方法

　�。ㄒ唬┘訌�(qiáng)臨床巡視

　　時(shí)刻關(guān)注豬場(chǎng)各個(gè)環(huán)節(jié)豬只異常情況，想方設(shè)法提升飼養(yǎng)人員責(zé)任心，一旦發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)嗜睡、輕觸不起、采食量減少，發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、關(guān)節(jié)腫脹/壞死、咳喘、腹式呼吸，育肥豬死淘率增高，母豬流產(chǎn)或出現(xiàn)死胎/木乃伊胎等可疑臨床表現(xiàn)時(shí)，應(yīng)第一時(shí)間采樣檢測(cè)。

　�。ǘ�）改進(jìn)主動(dòng)監(jiān)測(cè)

　　每周對(duì)豬群進(jìn)行病原和抗體檢測(cè)。在豬群進(jìn)行疫苗接種、轉(zhuǎn)群、去勢(shì)，或母豬分娩后，應(yīng)進(jìn)行采樣檢測(cè)。豬場(chǎng)出現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)暴露或周邊豬場(chǎng)出現(xiàn)感染時(shí)，按需進(jìn)行采樣檢測(cè)。

　�。ㄈ�）抽樣策��

　　對(duì)可疑豬的同舍和關(guān)聯(lián)舍豬群，采集深部咽拭子和抗凝血，進(jìn)行病原檢測(cè)，必要時(shí)采集血清進(jìn)行抗體檢測(cè)。對(duì)可疑豬及臨近豬接觸的地面、欄桿，以及舍內(nèi)人員接觸的物品等，采集環(huán)境樣品進(jìn)行病原檢測(cè)。病原檢測(cè)如果混檢，建議混樣數(shù)量不超過5個(gè)；抗體檢測(cè)不得混樣。

　�。ㄋ模�樣品選擇

　　對(duì)可疑豬，按檢出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴結(jié)（微創(chuàng)采集）、前腔靜脈抗凝血（EDTA）或尾根血、口鼻拭子。

　　對(duì)分娩母豬，應(yīng)采集臍帶血、胎衣；對(duì)死胎和流產(chǎn)胎兒，應(yīng)采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。

　　對(duì)病死豬，優(yōu)選采集部位為淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和肺臟。

　　血清樣本，按常規(guī)方法制備。

　　三、檢測(cè)方法

　　（一）病原檢測(cè)方法

　　采用非洲豬瘟病毒（P72/CD2v/MGF）三重?zé)晒釶CR方法檢測(cè)核酸，詳見“農(nóng)辦牧〔2020〕39號(hào)”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測(cè)規(guī)范》。必要時(shí)可測(cè)序鑒別。

　�。ǘ�）抗體檢測(cè)方法

　　采用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測(cè)抗體水平，詳見《非洲豬瘟診斷技術(shù)》（GB/T 18648）。